Содержимое анти-GAD антител в сыворотке крови больных диабетической нейропатией при их лечении Эспа-липоном

Малыжев В.А., Анастасий Л.В., Скибун В.Н.

Одним из тяжелых осложнений сахарного диабета является дистальная полинейропатия, которая имеет прогрессирующий характер развития даже при применении широкого арсенала терапевтических средств [6]. Исследованиями последних лет установлено, что в организме больного инсулинзависимым сахарным диабетом (ИЗСД) образуется определенное количество аутоантител, являющихся свидетелями аутоиммунной деструкции β-клеток [1, 3]. Отмечено также, что эти же антитела вступают в реакцию и с соответствующими антигенами нервных клеток. Установлена коррелятивная связь между уровнем антиинсулиновых антител, антител к декарбоксилазе глутаминовой кислоты (анти-GAD), антител к фосфолипидам, ганглиозидам и фактору роста нервов в сыворотке крови и проявлениями диабетической нейропатии [4].

Исходя из этого, сформировалось предположение, что в генезе полинейропатии определенное значение имеют не только известные механизмы (накопление в периферических нервах сорбитола и фруктозы, что приводит к осмотическому отеку клеток; истощение миоинозитола, в случае чего нарушаются биоэнергетические процессы в аксоне; неферментативное гликозилирование длительно существующих протеинов; повреждение интраневральних сосудов), но и патологические изменения в миелизированных и немиелизированных аксонах нервов, которые обусловлены аутоиммунными реакциями. Это обстоятельство диктует необходимость поиска новых лекарственных препаратов, которые бы специфически изменяли течение аутоиммунных процессов.

Ранее нами было установлено, что такой препарат α-липоевой кислоты как Эспа-липон у больных диабетической стопой проявлял не только нейротропные, но и иммунотропные свойства [2]. В частности, это манифестировалось повышением общего количества Т-лимфоцитов, снижением количества естественных киллеров и нормализацией содержания в сыворотке крови провоспалительных цитокинов.

Естественно, что терапевтический эффект препарата по отношению к нейропатии мог быть связан теоретически и с ингибированием аутоиммунных реакций. Подтверждение реальности этого предположения и было целью данной работы.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 40 больных сахарным диабетом. У 36,3% из них установлен диагноз ИЗСД, у 63,7% - ИНСД. Срок заболевания составлял в среднем 12,7 лет. У всех больных диагностировалась дистальная полинейропатия различной степени тяжести.

Анти-GAD в сыворотке крови выявляли иммуноферментным методом с помощью диагностического набора фирмы Boehringer Mannheim по стандартной методике.

Все больные в комплексном лечении получали α-липоевую кислоту в виде препарата Эспа-липон (Эспарма, Магдебург, Германия). Эспа-липон вводили внутривенно в дозе 600 мг в 200 мл 0,9% изотонического раствора 1 раз в сутки на протяжении 15 или 20 дней, в зависимости от тяжести полинейропатии.

Клинические и лабораторные исследования проводили до и после курса лечения Эспа-липоном по общепринятым методикам.

Статистическая обработка данных включала подсчет средних величин, дисперсионный и кластерный анализы.

Результаты и обсуждение. Исследование содержимого анти-GAD антител в сыворотке крови больных сахарным диабетом показало, что этот вид аутоантител обнаруживается не у всех больных, и частота их существования зависит от типа диабета. Как показано в табл. 1, зачастую данные антитела встречаются у больных ИЗСД (72,7%). У пациентов с ИНСД анти-GAD диагностируются лишь у 3 лиц из 29. Такое распределение анти-GAD положительных пациентов полностью совпадает с данными литературы [1]. Дисперсионный анализ клинических и лабораторных показателей обследованных больных ИЗСД и ИНСД при наличии (I группа) и отсутствия (II группа) анти-GAD антител выявил достоверное различие между показателями индекса массы тела, глюкозурии, а также болевой и тактильной чувствительностей нижних конечностей с достоверностью 95% (Р<0,05).

Как видно из табл. 2, у больных с наличием анти-GAD антител индекс массы тела существенно ниже этого показателя у больных, аутоантитела у которых не определялись. Объясняется это тем, что в I группу входили преимущественно больные ИЗСД, а во вторую - ИНСД, которым присуще характерное ожирение. Последним присуща и меньшая степень гипергликемии, а следовательно, и глюкозурии. Интерес представляют данные, характеризующие функцию периферических нервов, которая оценивалась по болевой, тактильной и вибрационной чувствительностям согласно методикам, предложенным Американской диабетической Ассоциацией. Установлено, что в случае циркуляции в крови анти-GAD антител эти виды чувствительности, кроме вибрационной, значительно меньше таковых у больных без антител. Это свидетельствует о более тяжелом течении нейропатии у больных, у которых происходит синтез аутоантител к декарбоксилазе глутаминовой кислоты. 

Таблица 1. Наличие анти-GAD в сыворотке крови больных сахарным диабетом (абсолютные и относительные показатели)

В результате проведения кластерного анализа получены дополнительные данные. Оказалось, что группа больных, у которых не определялись анти-GAD антитела, была однородной по всем 35 анализировавшимся клиническим и лабораторным показателям. В то же время, пациенты с наличием аутоантител четко распределились на 3 кластера, каждый из которых соответственно содержал 18,18%; 63,64%; 18,18% больных. Такая ситуация может свидетельствовать о существовании различных форм одной и той же патологии, что требует в дальнейшем более тщательных исследований.

Таблица 2. Показатели, между которыми существуют достоверные различия (Р<0,05) в группе больных с наличием анти-GAD антител

После проведенного лечения больных Эспа-липоном, прежде всего, подтвердилась его нейротропная  активность, поскольку у пациентов существенно улучшалось функциональное состояние периферических нервов. Об этом свидетельствует повышение уровней вибрационной (общей для обеих стоп), тактильной и болевой чувствительностей (табл. 3). Параллельно наблюдалось и улучшение самочувствия больных: снижение парестезии, уменьшение болей и слабости в конечностях. Следовательно, препарат оказывал содействие определенному восстановлению функции поврежденных нервов у больных как при ИЗСД, так и ИНСД. Хотя в последнем случае не отмечалось существенного улучшения болевой чувствительности.

Отмеченное иммунотропное действие Эспа-липона, тем не менее, не было связано с изменениями в аутоантителогенезе. Как видно из табл. 4, у всех больных ИЗСД и ИНСД Эспа-липон не привел к существенному снижению количества анти-GAD антител, хотя в определенной мере имеется положительная тенденция к падению их уровня в сыворотке. 

Таблица 3. Изменения порога чувствительности у больных нейропатией при лечении Эспа-липоном

Примечание: * - Р<0,05.

Полученные результаты подтвердили, что анти-GAD антитела зачастую встречаются у больных ИЗСД даже в периоды, когда, априори, в организме уже отсутствуют (3-клетки поджелудочной железы. По нашему мнению, длительное их персистирование в циркуляции может быть связано лишь с постоянной стимуляцией специфических антигенреактивных клеток за счет антигенных детерминант GAD иной локализации, в частности, нервных волокон. Этому способствует, очевидно, повреждение нервных клеток, присущее диабетической нейропатии, что приводит к своеобразному обнажению антигена на их поверхности. Поскольку нейропатия регистрировалась нами и у больных ИНСД без наличия анти-GAD антител, можно предположить, что последние не играют патологической роли при формировании этого осложнения диабета. В этом случае они могут рассматриваться лишь в качества свидетелей деструкции нервных клеток. Если это так, то определенное нами иммунотропное действие Эспа-липона может опосредованно свидетельствовать о способности препарата усиливать процессы регенерации нервов. Об этом говорит выявленная нами тенденция к снижению количества анти-GAD антител при одновременном восстановлении функции периферических нервов. Окончательный вывод по этому вопросу может быть сделан при измерении количества антител в более отдаленные сроки после начала лечения Эспа-липоном. Это вытекает из известного факта об относительно длинном периоде жизни иммуноглобулинов, в том числе и изучавшихся антител к ферменту.

Таблица 4. Содержимое анти-GAD в сыворотке крови больных сахарным диабетом с дисталъной полинейропатией до и после курса лечения Эспа-липоном (нг/мл)

Выводы.

1. У больных с диабетической дистальной нейропатией в сыворотке крови определяются анти-GAD антитела: при ИЗСД в 72,7% случаев, при ИНСД - в 10,3%.
2. При наличии в сыворотке крови анти-GAD антител отмечаются более выраженные  повреждения  функциональной деятельности периферических нервов,
3. Лечебный эффект Эспа-липона при диабетической нейропатии сопровождается тенденцией к снижению содержания анти-GAD антител в сыворотке крови,
4. При ИЗСД, на стадии полного отсутствия   β-клеток,   определение   анти-GAD антител надлежит рассматривать как   показатель   структурно-функционального повреждения нервных клеток, тогда как их наличие при ИНСД может являться   признаком   аутоиммунного разрушения   β-клеток   поджелудочной железы.

Настоящая работа была проведена для выяснения возможного нейротропного действия Эспа-липона, связанного с ингибицией аутоиммунных реакций, которые гипотетически рассматриваются в качестве причины диабетической нейропатии. Исследовали сыворотки крови 40 больных ИЗСД и ИНСД. Определяли содержание в них антител к декарбоксилазе глутаминовой кислоты (GAD) иммуноферментным методом. Обнаружено, что данные антитела наиболее часто встречаются при ИЗСД (в 72,7% слу¬чаев). У больных ИНСД анти-GAD антитела выявлялись только у 10,3% пациентов. При применении Эспа-липона на протяжении 15-20-ти дней наблюдалось существенное улучшение функции дистапьных нервных окончаний, на фоне чего обнаруживалась лишь тенденция к снижению количества анти-GAD антител в крови. Сравнительный анализ этих показателей с 35 клинико-лабораторными параметрами позволил заключить, что анти-GAD антитела не принимают участия в разрушении нервных клеток, а являются лишь маркерами их структурных изменений. Детекция этих антител в крови может служить показателем тяжести нейропатии и критерием лечебного эффекта проводимой терапии.

 Опубликовано в журнале «Ліки» №2'1999